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漾濞泡核桃 ISSR-PCR 反应体系的建立和优化
作者: 周林涛 [1] ; 陆斌 [2] ; 周军 [1] ; 苏为耿 [3] ; 原晓龙 [1] ; 孟富宣 [1]
关键词: 漾濞泡核桃 ISSR-PCR反应体系 正交优化 扩增效果
摘要：以漾濞泡核桃优株为研究对象，研究其ISSR-PCR反应体系中的5个影响因子（模板DNA浓度、Taq DNA 聚合酶浓度、引物浓度、dNTPs浓度、Mg2＋浓度）对PCR扩增效果的影响，从而建立起漾濞泡核桃的最佳ISSR-PCR反应体系。结果表明：模板DNA最佳浓度为50 ng/（25μL），Taq聚合酶浓度为0.75U/（25μL），引物浓度为0.7mmol/L，dNTPs浓度为0.20mmol/L，Mg2＋浓度为2.0mmol/L，利用该最佳体系对试验中所选取的样本进行扩增反应。建立了适宜于漾濞泡核桃的ISSR-PCR扩增的最佳体系，该体系的建立为利用ISSR分子标记技术对漾濞泡核桃进行种质资源研究奠定了基础。